Особенности устройства и варианты оформления межкомнатных дверей, обшитых шпоном
Благородный шарм дуба, вишни, ореха, ясеня, красного дерева, отражённый в облике межкомнатных створок, завораживает и восхищает. Створки из натуральной древесины гармонично дополняют уютное домашнее пространство, принося с собой необыкновенное тепло, повышая престиж интерьеров, демонстрируя взыскательный вкус владельцев. Однако качественный массив – элитный, дорогостоящий материал, и произведённые из него модели рискуют нанести серьёзный удар по бюджету семьи. Избежать чрезмерных вложений, не отказываясь от живой прелести и богатства ценных пород, помогут двери, обшитые шпоном.
В их изготовлении используют:
- недорогие сорта древесины в роли прочного и стабильного каркаса. Чаще всего применяется хорошо просушенная и обработанная сосна, создающая довольно лёгкую, но жёсткую основу;
- демпфирующую прослойку из МДФ. Синтетическая плита служит для двухсторонней облицовки несущей рамы либо участвует в производстве филёнок.
- срез толщиной 1-2 мм, который наносится на комбинированную заготовку с помощью безвредного, лишённого запаха клея. Признаком высокого качества продукта является целостное покрытие без видимых стыков между декоративными пластинами. Когда рисунок не обрывается, а торцы тщательно обклеены, складывается впечатление, будто полотно изготовлено из цельного дерева. Грамотно выполненная дверь, обшитая шпоном, внешне не уступает варианту из массива, но обладает куда более доступной ценой.
Завершающий штрих – обработка поверхности защитным лаком. Современные производители применяют двухкомпонентный полиуретановый состав, отличающийся прочностью и экологической чистотой. Такой лак не скрывает узор древесины и не меняет её цвет, но при этом значительно повышает влаго- и износостойкость изделия.
Каким стилям подчинены конструкции?
С широким многообразием межкомнатных дверей, обшитых шпоном, знакомит каталог торговой марки Academy. В ассортимент фирмы вошли модели, вдохновлённые:
- элегантной и респектабельной классикой. Ценителям «английских» интерьеров придутся по вкусу решения, представленные в коллекции Piemonte. Облицованные срезом светлого или тёмного ореха, они дополнены выразительными прямоугольными филёнками, изящными решётчатыми стёклами, строгими порталами с интересным рельефом;
- лаконичной красотой урбанистических направлений. Серии Torino, Glasgow, Scandi посвящены современному стилю – немногословному, но оригинальному. Гладкие поверхности, прямоугольные формы, минималистские украшения в виде молдингов и чётких линий резьбы создают их актуальный облик.
Купить двери, обшитые шпоном, компания предлагает в комплекте с коробом и наличниками на две стороны. Все детали набора идеально гармонируют по цвету и составляют монолитный союз.
Сборкой и монтажом конструкций занимаются сотрудники фирмы.
обшитый — это… Что такое обшитый?
ОБШИТЫЙ — ОБШИТЫЙ, обшитая, обшитое; обшит, обшита, обшито. прич. страд. прош. вр. от обшить. Толковый словарь Ушакова. Д.Н. Ушаков. 1935 1940 … Толковый словарь Ушакова
обшитый — обш итый … Русский орфографический словарь
обшитый — об/ши/т/ый … Морфемно-орфографический словарь
обшитый тесом — прил., кол во синонимов: 1 • тесовый (4) Словарь синонимов ASIS. В.Н. Тришин. 2013 … Словарь синонимов
обшитый (досками)
— — [http://slovarionline.ru/anglo russkiy slovar neftegazovoy promyishlennosti/] Тематики нефтегазовая промышленность EN boarded … Справочник технического переводчикаобшитый деревом — в деревянной обшивке — [http://slovarionline.ru/anglo russkiy slovar neftegazovoy promyishlennosti/] Тематики нефтегазовая промышленность Синонимы в деревянной обшивке EN cased with wood … Справочник технического переводчика
Леонид, архиепископ Новгородский — архиепископ Новгородский, был сначала архимандритом Юрьева монастыря в Новгороде, откуда в 1568 г.
перемещен архимандритом в Чудов монастырь; 4 декабря 1571 г. он был хиротонисан в архиепископа Новгородского. В Новгород Леонид прибыл 23 декабря… … Большая биографическая энциклопедия
БЕЙФУТ — (Parrel) кусок троса, обшитый кожей, с помощью которого рей или гафель удерживается в обхват у мачты или стеньги. У нижних реев Б. бывают железные с вертлюгами. Самойлов К. И. Морской словарь. М. Л.: Государственное Военно морское Издательство… … Морской словарь
Albatros D.I — Тип истребитель Разработчик Albatros Flugzeugwerke Производитель Albatros Flugzeugwerke Главный к … Википедия
Список бронетехники СССР Второй мировой войны — Эмблема ВС СССР В список вошла бронетехника СССР произведённая не только в период Второй мировой войны, но и в предвоенное время, которая использовалась на ранней стадии войны[1][2]. Опытные и не пошедшие в серийное производство образцы не вошли… … Википедия
Отделка лестницы ламинатом своими руками: пошаговый инструктаж
Ламинат – универсальный напольный материал.
Он годится не только для укладки на пол, но и для обшивки лестниц. Такой вариант отделки особенно подойдет для бетонных лестниц, которые сами по себе часто выглядят тяжеловесно и неэстетично. Ламинированная отделка придаст монолитному бетону шарм деревянной конструкции. Также ламинатом можно обшить и старую деревянную лестницу, которая порядком поизносилась внешне (но все ее элементы еще достаточно прочные!) и нуждается в эстетической реставрации.
Материалы, необходимые для отделки лестницы
Для отделки лестницы необходимо приобрести:
- ламинат – коммерческого класса, с шириной, соответствующей размерам ступени;
- краевой профиль – металлический, деревянный, пластиковый порожек или специализированный ламинированный профиль;
- клей для ламината – полиуретановый, эпоксидный;
- саморезы (шурупы, болты).
Какой ламинат подходит для отделки лестниц?
Ступеньки лестницы в процессе эксплуатации испытывают большие нагрузки. Поэтому бытовой материал с тонким защитным слоем для лестниц не используют.
Классы ламината, рекомендованные специалистами для обшивки лестниц, – 31,32,33, 34. Это коммерческие ламинаты, предназначенные для поверхностей с интенсивной нагрузкой. Первая цифра в маркировке (3) означает, что ламинат относится к коммерческому классу. Вторая цифра (1,2,3,4) определяет толщину защитного верхнего слоя.
Вторая характеристика, важная для отделки лестницы, — это ширина ламинированных ламелей. В идеале, одна доска ламината по ширине должна перекрывать всю плоскость проступи или подступенка. Иначе, если ступень будет шире, для отделки придется задействовать несколько ламелей и соединять их замками. Отделанная таким образом поверхность менее прочная, чем полностью монолитная. Если в лестнице предусмотрены марши (площадки) замковых соединений не избежать. На этих участках ламинат укладывают обычным способом, то есть замок в замок.
Виды краевого профиля (молдинга)
Кроме ламината, важнейшим элементом обшивки лестницы является краевой профиль или молдинг.
Так называют накладную выпуклую планку, которой декорируют краевой угол ступени. В чем состоит функция молдинга? Все очень просто. При отделке лестницы две планки ламината, уложенные на проступь и подступенок, стыкуются между собой. Образуется неэстетичный угол, выставляющий на обозрение сечение двух ламелей. Чтобы прикрыть этот стык и заодно усилить прочность крепления ламината, используют краевые профили. Их накладывают сверху на стык, закрепляют с помощью клея или саморезов.
В качестве краевого профиля часто используют обычные металлические г-образные порожки из металла. Их еще называют лестничными. Эти порожки могут быть изготовлены из алюминия, стали, латуни. Пользуются популярностью окраски под золото, бронзу, стали или дерево.
Металлические молдинги имеют не только декоративный эффект. Они защищают края ступеней от износа. Кроме того, поверхность такого профиля часто рифленая и это придает поверхности ступенек дополнительный противоскользящий эффект.
Пластиковые порожки – имеют вид уголков разного оттенка.
Можно с легкостью подобрать цвет под существующее ламинатное покрытие. Пластиковые порожки идеально защищают края ступеней, образуют ровный угол, скрывают неровности. Отличаются от других лестничных порожков небольшой ценой. Крепятся они преимущественно на клей, поэтому особое внимание при установке пластиковых порожков нужно уделить выбору качественного прочного клея.
Деревянные порожки – еще один вариант. Такие порожки отлично сочетаются с ламинатом, имеют большой срок годности (кроме того, они поддаются мелкому ремонту – шлифовке, шпаклевке, окраске). Недостаток деревянных молдингов – высокая цена. Крепление выполняется либо на клей, либо на саморезы (болты).
Кроме обычных порожков-уголков, существуют и специальные ламинированные профили, крепящиеся к ступени при помощи металлических направляющих. Например, широко известны подобные профили Incizo от Quick Step (Бельгия). Для установки такого профиля используется специальная алюминиевая планка г-образного вида, выпускаемая в нескольких типоразмерах (высота планки от Quick Step – 7, 8 и 9,5 см).
Для установки краевого профиля данного вида, к поверхности ступени с помощью шурупов крепится металлическая направляющая планка. А затем, в ее пазы, вставляется ламинированный профиль (на клей). Таким образом фиксация профиля получается максимально прочной, при этом удается обойтись без металлических элементов крепления, видимых на поверхности.
Пошаговый инструктаж по проведению работ
Рассмотрим полную технологию обшивки лестницы ламинатом, с учетом установки краевого профиля.
Способ #1. Использование специализированного профиля
1. При наличии старого покрытия на ступенях, его необходимо убрать. Линолеум, ковролин, старая краска – все подлежит ликвидации. Счищают также следы от клея, жира. Удаляют гвозди, скобы, саморезы.
Если первоначальная форма ступени предполагает наличие выступа (проступь нависает над подступенком), то его можно срезать электролобзиком. Либо закрыть пространство под ступенями, путем закрепления на вертикальной плоскости подступенка нескольких брусков, а поверх них – листа фанеры.
Поверхность бетонной лестницы по возможности выравнивают. Выбоины, неровности заполняют цементным раствором (если щели большие – бетоном). Затем, после высыхания раствора, поверхность шлифуют шлифовальной бумагой. Чтобы убрать цементную пыль, ступеньки пылесосят, а после – протирают влажной тканью. Для более плотной адгезии клея, на бетонную поверхность наносят слой грунтовки с помощью валика или широкой кисти (маклавицы).
С деревянной лестницей, которую планируют обшить ламинатом, дела обстоят по-другому. Вначале проверяют все опорные элементы на наличие скрипов, расшатывания, проседания. Если что-то из этого списка имеет место быть, перебирают детали конструкции – снимают их (в некоторых случаях заменяют на новые) и закрепляют заново, более плотно. Щели, трещины, впадины заполняют шпаклевкой по дереву.
2. Измеряют длину и ширину ступени (проступи и подступенка), переносят эти размеры на ламинатную доску. Вырезают (болгаркой, лобзиком и т.п.) заготовки по отмеченным линиям.
Все полученные панели нумеруют для того, чтобы в дальнейшем не перепутать, для какой ступени предназначена та или иная заготовка.
3. Начинают крепление ламината с верхней ступени. Таким образом, в процессе монтажа, работник будет продвигаться вниз, не наступая на только что уложенные ламели (соответственно, не сдвигая их до момента полного высыхания клея).
Вначале на подступенок (вертикальная часть ступени) наносят клей, приставляют к поверхности ламинатную доску, плотно прижимают для фиксации. Между поверхностью следующей ступеньки и прикрепленной доской подступенка должно остаться небольшое расстояние, равное толщине используемого ламината. Этот зазор необходим, чтобы можно было нижележащую доску проступи (горизонтальной части ступени) задвинуть под доску подступенка. Зазор устраивают путем установки подкладок-опор под вертикальную доску подступенка (например, брусков или специальных прокладок).
4. На обратную сторону металлического направляющего профиля наносят клей.
Профиль укладывают сверху ступени, на ее край, и прижимают к поверхности. В этом случае клеевого соединения недостаточно. Поэтому верхнюю планку профиля дополнительно закрепляют на проступи шурупами. Их ввинчивают через каждые 15 см.
5. На проступь наносят клей, равномерно распределяют его по поверхности зубчатым шпателем.
6. Сверху на проступь горизонтально укладывают доску ламината. Если это – первая проступь, идущая вровень с полом, ламель ступени соединяют с остальным ламинированным настилом традиционно – замок в замок. Последующие доски проступей задвигают под вышележащие вертикальные доски подступенков.
7. В элементы краевого профиля устанавливают резиновую вставку. Способ этой установки будет зависеть от типа выбранного ламинированного профиля. В некоторых случаях резиновую вставку надевают на шип доски проступи. В других случаях резиновая вставка устанавливается в паз самого ламинированного профиля.
8. Все пазы ламинированного краевого профиля заполняют клеем.
Надевают профиль на металлическую направляющую и резиновую вставку. Деталь должна прочно «встать на свое место», чтобы между ней и переходным металлическим профилем не осталось зазоров.
9. Все этапы работы по отделке повторяют для каждой последующей ступени. То есть последовательно обшивают каждую ступень, постепенно продвигаясь к основанию лестницы. Последовательность отделки можно и поменять, выполняя каждый тип работ последовательно. Вначале закрепляют все ламели подступенков, затем – все металлические профили, затем – доски проступей и ламинированные краевые профили.
10. По только что закрепленным ламелям не рекомендуется ходить как минимум 24 часа, до момента полного высыхания клея. Следует помнить, что основное крепление элементов ламинатного покрытия на лестнице – клеевое, требующее время на набирание прочности.
Способ #2. Использование г-образных порожков
Этот вариант выполняется проще, хотя и результат обшивки может оказаться несколько хуже (по декоративному эффекту и прочности).
1. Выполняют подготовку поверхностей лестницы (уборка старого покрытия, очищение, обеспыливание, при необходимости – выравнивание и упрочнение элементов).
2. Измеряют длину и ширину каждой ступени, переносят размеры на ламинатные доски. Вырезают заготовки и нумеруют их.
3. На подступенок наносят клей, распределяют его зубчатым шпателем. Приклеивают к поверхности ламинированную доску. Размеры доски должны быть такими, чтобы нижний край не доходил до нижележащей ступени. То есть необходимо сформировать зазор, равный толщине используемого ламината.
4. На горизонтальную плоскость проступи наносят клей, равномерно распределяют его зубчатым шпателем до тонкой пленки. Прижимают к ступени заготовленный ламель.
5. На краю ступени фиксируют выбранный порожек. Металлический порожек закрепляют шурупами, которые ввинчивают в специальные крепежные отверстия. Пластиковые порожки фиксируют с помощью клеевого соединения (особенно популярен при этом клей «Жидкие гвозди»). Деревянные молдинги – универсального крепления, могут быть монтированы любым способом.
6. Те же работы выполняют для всех нижележащих ступеней.
7. После окончания обшивки ходить по лестнице можно только через 24 часа. Если краевые профили держатся исключительно на клеевом соединении, срок выдержки желательно увеличить до двух суток. В этом случае можно быть уверенным, что элементы обшивки качественно закреплены.
Способ #3. Quick Step + Incizo
Технология обшивки лестницы ламинатом, на примере использования материала марки Quick Step и профиля Incizo, представлена на видео:
Оцените статью: Поделитесь с друзьями!воспоминания жителей Удмуртии о событиях в Чернобыле спустя 35 лет
Юлия ИвшинаВ 2021 году исполнилось 35 лет со дня аварии на Чернобыльской атомной электростанции. Теперь ее называют самой крупной катастрофой в истории «мирного атома». Но тогда население не знало, какая именно трагедия произошла ранним утром 26 апреля 1986 года.
По материалам содержащихся в Национальной библиотеке республики газет информагентству «Удмуртия» удалось собрать воспоминания жителей региона – участников ликвидации последствий аварии в Чернобыле.
Первые дниНочь, 26 апреля 1986 года. Водитель Управления строительства ЧАЭС Николай Сидоров со своим начальником отправился на станцию к пруду ловить браконьеров.
«Вдруг услышали глухой взрыв и увидели, как с крыши четвертого энергоблока, как из жерла вулкана, высоко вверх стали вылетать сверкающие сгустки. Это напоминало фейерверк и было совсем не страшно. Так же, как во время фейерверка, сгустки рассыпались на многоцветные искры и падали в разные стороны. <…> Воздух был раскален. Казалось, дышишь жаром от раскаленной сковороды. <…> Вскоре над энергоблоком поднялось облако, вытянулось по горизонтали в черную тучу и пошло в сторону дороги. Из этой тучи на землю капали мелкие-мелкие капли и уходили в песок» (газета «Центр» от 1 мая 2003 года).
Люди понимали, что произошла какая-то авария, но никто не знал, какая именно. Мастер Ижевского завода, ликвидатор последствий на Чернобыльской АЭС Владимир Агеев в интервью «Удмуртской правде» 2006 года вспоминал, что в то время было мало информации о том, как радиация действует на живые организмы. Не знали и как защититься от облучения.
Игорь Дедов провел в Чернобыле 12 лет в качестве кадрового работника ЧАЭС. Своими воспоминаниями о «черном» 26 апреля 1986-го он поделился в газете «Известия Удмуртской Республики» в 2011 году.
«Телевидение и газеты объявили об аварии, но как-то скупо, с недомолвками и непременными заверениями о благополучном исходе. На этой ноте люди ушли на майские праздники. <…> Прошли майские праздники, прокатилась по улицам Киева «Велогонка Мира». И только 10 мая, как из рога изобилия, посыпалась из СМИ вся правда о чернобыльской аварии».
Тогда же началась мобилизация специалистов – работников АЭС.
Ехать нельзя отказатьсяПервые группы людей из Удмуртии для ликвидации последствий аварии отправили в июне 1986 года.
Для военных Чернобыль стал второй армией. Спустя годы все ликвидаторы, как один утверждают: отказаться от опасной командировки они не могли. Каждый из них понимал, какое важное и ответственное поручение им дано.
«Каждому из нас официально давалось право отказаться от опасной командировки. <…> Но отказаться, убежать, спрятаться – только бы не попасть в Чернобыль, я не мог» (Игорь Дедов)
«Понимали, что надо сделать все, чтобы эта зараза не распространялась дальше, не вредила миру.
Причем сделать любой ценой, ценой здоровья и даже жизни. Там было не до почитания чинов и званий, в зоне АЭС работали без знаков отличия, в фуфайках, робах» (Владимир Агеев).
В отличие от тех, кто попал в зону отчуждения по приказу или по соображениям совести, были и те, кто ехал в Чернобыль в корыстных целях.
«С нами в автобусе два молоденьких лейтенанта. Они очень напряжены и на контакт идут неохотно. <…> Бригадир из кадровых работников АЭС спрашивает: «Если так боитесь, что же тогда приехали?» Ответ был для нас удивительным: «За званиями и выслугой». Позже я встречал многих таких лейтенантов уже с майорскими звездами. К концу 1987 года административный корпус трещал от наплыва желающих поработать на благо Отчизны» (Игорь Дедов).
Спецодежда и спецтехникаВ первые недели после аварии работники должны были надевать два слоя одежды: обычную спецовку, а поверх нее – комплект из белой плотной защитной ткани, который менялся каждый день. Лицо и голову защищали специальная «маска-лепесток» и головной убор. Однако летом, при температуре +20…+25°С, такая спецодежда казалась пыткой. Поэтому вскоре многие ликвидаторы стали пренебрегать вторым комплектом одежды.
«Мы даже одежду не обрабатывали. Мы ходили в обычной солдатской форме, полностью зараженной, даже спали в ней», — вспоминает Александр Широбоков.
«Работали люди с помощью самой обычной техники, а кое-где, в том числе и на крыше, и вручную. При этом они не всегда понимали степень опасности» (Геннадий Тебеньков).
Источник: Московский дом фотографии Фото: Неизвестный автор © russiainphoto.ru«На работу нас доставляли спецмашинами. <…> Спецмашины представляли собой автобусы ЛАЗ, обшитые внутри свинцовыми листами, из-за этого они становились очень тяжелыми и медленными» (Игорь Дедов).
За время работы в зоне специалистам допускалось накопить не более 25 рентген, в противном случае работников отправляли домой.
Одним из первых во главе взвода парней из Удмуртии на ликвидацию аварии отправился бывший командир взвода радиационно-химической разведки Геннадий Тебеньков. Его нашли, когда он работал на Сарапульском заводе.
«Зона была уже оцеплена и совершенно пуста. Хлопали форточки и двери в пустых домах, полных всякого добра, правда, иногда что-то тащили мародеры, особенно автомобили из гаражей. Но самое жуткое впечатление оставил вековой сосновый лес, где огромные корабельные сосны стояли как живые, но при малейшем прикосновении рассыпались как труха».
В памяти ликвидаторов навсегда остались страшные картины полуразрушенного, опустошенного города Припять, которые некогда представлял собой «эталон градостроения» и был «столицей всех атомных городков СССР».
«В апрельское утро 1986 года город фактически умер, хотя жители еще три дня ходили по его улицам. Людям сказали: «Эвакуация на два-три дня», как оказалось – навсегда.
Я видел лица припятчан, работающих рядом со мной, когда разговор заходил о городе. И у меня стоял ком в горле, видя их слезы». (Игорь Дедов).
Еще один участник ликвидации последствий аварии Виктор Лацевич отмечал, что до командировки в Припять никогда не боялся смерти.
«А тут ничего живого: ни птиц, ни кошек, собаки, правда, встречались. Мертвый город. Казалось, даже смертью пахнет. Заходишь в квартиры, а там где-то кровати не заправлены, где-то одежда валяется, где-то стол накрыт, как будто гостей ждут. И нет никого. Такое чувство, будто людей застали врасплох…»
Во время эвакуации местные жители выпустили своих животных, все они слонялись по опустевшему городу, а в заброшенных домах хозяйничали мародеры. Вспоминает Владимир Кочуров:
«Местные жители, эвакуированные из 30-километровой мертвой зоны, тайно проникали в нее и грабили брошенные их земляками дома и квартиры.
Самое страшное, что они брали вещи не только для себя, но и для продажи. А люди и не подозревали, что покупают верную смерть, мину замедленного действия» (газета «Центр» от 22.04.2004).
Ликвидаторы навсегда оставили свое здоровье в Чернобыле. Виктор Лацевич уезжал в опасную командировку в одежде 50-го размера, а вернулся – 46-го.
«Уже на третий день нахождения в Чернобыле я почувствовал какую-то горечь на губах, опухли гланды, стало больно глотать. Потом появилась общая слабость».
Мужчина провел в зоне 48 дней и принял 26 рентген. По возвращении на Родину ему было тяжело поднять даже ложку.
Геннадий Стрелков из Ижевска во время пребывания в Чернобыле боролся с радиоактивной пылью, которая была повсюду.
«Военные вертолетчики сбрасывали с воздуха в «кратер» охотничью дробь и слитки свинца. Там все это превращалось в пар, и свинцовая пыль оседала везде – до сих пор ощущение металлического привкуса осталось на зубах… После этой работы ноги у вертолетчиков покрывались волдырями и шелушились (попросту сходила кожа)…»
Источник: Московский дом фотографии Фото: Неизвестный автор © russiainphoto.ruНа ликвидацию последствий Чернобыльской аварии выезжали свыше 800 тыс. человек, среди них более 3 тыс. жителей Удмуртии. Многих из них уже нет в живых.
Сегодня инвалидов, ветеранов радиационных аварий, а также вдов и детей ликвидаторов поддерживает региональная общественная организация Союз «Чернобыль». Союз объединяет в своих рядах более 3,5 тыс. человек.
Читайте ИА «Удмуртия»:
синонимов в оболочке, антонимов в оболочке | Тезаурус Мерриам-Вебстера
накрыть чем-то, что защищает- иногда кораблестроители обшивают днище корабля медью для дополнительной защиты от ракушек и других угроз
- тисненая,
- вышитая,
- в объятиях,
- заключенный,
- закрытый
- (также прилагается),
- охвачено,
- окутанная,
- в конверте,
- завернутый,
- инвестировано,
- притертая,
- покрытый оболочкой,
- окутанная,
- в окружении,
- обмотанный,
- завуалированная,
- завернутый
Какое еще слово означает закрытый? | Закрытые синонимы
Размещено в
Из набора, который может быть включен в шар конечного радиуса
Боязнь оказаться в замкнутом пространстве
В рамке
Содержится как часть рассматриваемого целого
Подарок вместе с (чем-то)
Прочно или надежно окруженный
Имея крышу
Находится или спроектирован для использования или переноски внутри здания
Герметичный для обеспечения герметичности
Состоять из, как часть целого
Прошедшее время для окружения или образования круга вокруг
«Высокие стены ограждают двор, а на стене охраняют чиновники в форме.”
Прошедшее время для окаймления или формирования границы вокруг
«Величественные деревья окружают большую плоскую лужайку перед домом, придавая ему естественный, простой вид и отделяя его от сельской деревни».
Прошедшая форма для кромки или закрытия со всех сторон
«Если вы позволяете собакам выходить на улицу в одиночку, убедитесь, что поместили их в огражденную часть двора».
Прошедшее время для плотного или плотного обертывания
«Таким образом, заключает ребенка в защищенный от непогоды кокон, сохраняя его в безопасности в любых условиях.”
Прошедшая форма для вставки в контейнер, обычно конверт или пакет
«Мы приложим конверт с обратным адресом как часть нашей корреспонденции для вашего удобства».
Прошедшая форма для разделения физического пространства или области
Прошедшее время для принуждения (человека или животного) к месту или ситуации, из которых трудно выбраться
С вышитым или украшенным животом
Прошедшее время, чтобы содержать или иметь в пределах
Прошедшее время для прочной и глубокой фиксации (объекта) в окружающей массе
Прошедшая форма для облицовки шпоном
Прошедшая форма для блокировки или закрытия проема
Прошедшая форма, закрывающая отверстие
Связанные слова и фразы
Преимущества термопар в оболочке
Термопары прочны и быстро реагируют на изменения температуры.В оболочке эти приборы для измерения температуры чрезвычайно устойчивы к вибрации, механическим нагрузкам и агрессивным / коррозионным средам. Поскольку термопары в оболочке маленькие и легко изгибаются, они идеально подходят для использования в ограниченных пространствах.
Что такое термопары в оболочке?
Надежные и чувствительные термопары широко используются в различных приложениях и являются недорогим решением для измерения температуры.
Термопара состоит из двух разнородных металлических проволок, соединенных в точке измерения (горячий спай).Другой конец — это контрольная точка (холодный спай), где температура имеет постоянное и известное значение. При повышении температуры в точке измерения разные металлы генерируют разное напряжение (эффект Зеебека). Разница в напряжении на холодном спае соответствует температуре горячего спая.
Термопара в оболочке — это тип термопары, в которой провода вставлены и изолированы керамическим компаундом высокой плотности, обычно оксидом магния, а затем заключены в металлическую оболочку.Обычными материалами оболочки являются нержавеющая сталь или сплав 600, но можно использовать любой металл, который можно подвергать холодной обработке.
Преимущества термопар в оболочке
- Устойчивость к вибрации и ударам. Металлическая оболочка и кабель MI защищают проводники от ударов и вибрации, предотвращая поломку и делая термопары в оболочке очень устойчивыми к механическим воздействиям.
- Устойчив к коррозии и агрессивным средам. Нержавеющая сталь 316 обладает хорошей устойчивостью к агрессивным средам, а также парам и дымовым газам в химических средах.Коррозионно-стойкие свойства сплава 600 делают его особенно подходящим для термопар, которым приходится иметь дело с высокими температурами. Он также противостоит растрескиванию и питтингу в средах, содержащих хлор, и коррозии, вызываемой хлористым водородом или аммиаком в водных растворах.
- Маленький и гибкий. Защитная металлическая оболочка позволяет использовать более тонкие проводники и более компактную конструкцию, чем у термопар без оболочки. Диаметр термопар в оболочке может составлять всего 0 мм.25 мм (0,010 ″) без нарушения целостности инструмента. Металлическая оболочка также придает гибкость, что позволяет изгибать без повреждения чувствительного элемента. Таким образом, термопары в оболочке особенно полезны для измерения температуры в небольших помещениях и в узких углах.
- Пределы проводимости и высоких температур. Металлическая оболочка выдерживает очень высокие температуры воздуха: до 850 ° C (1562 ° F) для нержавеющей стали 316 и до 1200 ° C (2192 ° F) для сплава 600 — в зависимости от типа термопары.Оболочка также обеспечивает лучшую теплопроводность, чем термопары без оболочки, тем самым уменьшая время теплового запаздывания и приводя к еще более быстрому отклику.
WIKA производит полные линии термопар в оболочке типа K, типа J, типа N, типа E и типа T. Мы также производим термопары типов R, S и B для широкого диапазона температур и областей применения. Свяжитесь с экспертами WIKA для получения дополнительной информации.
Молекулярная архитектура покрытого оболочкой полярного жгутика у Vibrio alginolyticus
Значение
Многие важные бактериальные патогены, такие как Vibrio cholerae и Helicobacter pylori , используют покрытый оболочкой жгутик в качестве основной органеллы для движения.Хотя бактериальные жгутики широко изучались в модельных системах, таких как Escherichia coli и Salmonella , о покрытых оболочкой жгутиках известно относительно мало. В этом исследовании мы используем криоэлектронную томографию с высокой пропускной способностью для визуализации тысяч полярных жгутиков у Vibrio alginolyticus . Мы не только раскрываем беспрецедентные детали жгутиков с оболочкой у V. alginolyticus , но также раскрываем ключевые различия между жгутиками с оболочкой и без оболочки у одного и того же вида Vibrio .Наши исследования дают представление об уникальных аспектах покрытых оболочкой жгутиков, которые эффективно используются многими бактериальными патогенами для установления инфекции и распространения среди людей и других млекопитающих-хозяев.
Abstract
Виды Vibrio — это грамотрицательные палочковидные бактерии, которые распространены повсеместно и часто очень подвижны в водной среде. Vibrio плавательная подвижность обеспечивается полярным жгутиком, покрытым перепончатой оболочкой, но этот покрытый оболочкой жгутик плохо изучен на молекулярном уровне из-за ограниченной структурной информации.Здесь мы используем Vibrio alginolyticus в качестве модельной системы для изучения покрытого оболочкой жгутика в интактных клетках путем сочетания криоэлектронной томографии (крио-ЭТ) и анализа субтомограмм с генетическим подходом. Мы обнаруживаем поразительные различия между жгутиками в оболочке и без оболочки в клетках V. alginolyticus , включая новую кольцевую структуру в нижней части крючка, которая связана с основным ремоделированием внешней мембраны и образованием оболочки. Используя мутанты, дефектные в моторных компонентах жгутика, мы определили специфическую особенность Vibrio- (также известную как Т-кольцо) как характерную периплазматическую структуру с 13-кратной симметрией.Уникальная архитектура Т-образного кольца обеспечивает статическую платформу для набора комплексов PomA / B, которые необходимы для создания более высоких крутящих моментов для вращения покрытого оболочкой жгутика и быстрой подвижности клеток Vibrio . Более того, жгутиковый мотор Vibrio обнаруживает внутреннюю вариацию длины между связанными с внутренней и внешней мембраной комплексами, это указывает на то, что комплекс, связанный с внешней мембраной, может немного сдвигаться вдоль осевого стержня во время вращения жгутика. Вместе наш подробный анализ полярных жгутиков в интактных клетках дает представление об уникальных аспектах покрытого оболочкой жгутика и об особой подвижности видов Vibrio .
Подвижность часто важна для вирулентности бактериальных патогенов, а жгутик является главной органеллой подвижности многих бактерий. У большинства бактерий с внешними жгутиками, таких как Escherichia coli и Salmonella enterica , жгутики функционируют как пропеллеры: вращение жгутиков против часовой стрелки приводит к объединению жгутиков вместе и плавному плаванию клетки (бегу), тогда как вращение по часовой стрелке жгутики вызывают случайное вращение клетки с небольшим поступательным движением (переворачивание) (1-3).Сложная хемотаксическая сигнальная система позволяет бактериям улавливать химические стимулы и эффективно плыть к благоприятным условиям с помощью предвзятого случайного блуждания, комбинации «бега» и «кувырка» (1, 4).
Жгутик — это большой макромолекулярный узел, состоящий из длинной нити, крючка и двигателя. Жгутиковый мотор — это замечательная наномашина, встроенная в оболочку бактериальной клетки. Для сборки мотора требуется более 20 различных белков, которые можно разделить на несколько морфологических доменов.Кольцо MS встроено в цитоплазматическую мембрану. Кольцо C, известное как комплекс переключения, и устройство экспорта расположены на цитоплазматической стороне кольца MS. Стержень соединяет кольцо MS и крючок и обычно делится на дистальный стержень и проксимальный стержень. Кольца L и P на стержне действуют как втулки на внешней мембране и в слое пептидогликана соответственно. Статор — это генератор крутящего момента, встроенный в цитоплазматическую мембрану. В E. coli и Salmonella двухмембранный белковый комплекс, состоящий из MotA и MotB, функционирует как статор, прикрепляясь к слою пептидогликана.Приводимый в действие движущей силой протонов, статор генерирует крутящий момент, необходимый для вращения двигателя, крюка и нити накала. У статора есть несколько общих черт, несмотря на различие в задействованных ионах и белках. Как правило, несколько блоков статора работают вместе (5), хотя одного статора достаточно для создания крутящего момента (6). Поэтапное фотообесцвечивание функционирующей моторной области показало, что статор очень динамичен и может быстро присоединяться к ротору или отделяться от него (5).Недавние отчеты показали, что ассоциация статор-ротор зависит от проводящих ионов (7, 8) и крутящего момента (9⇓ – 11).
Виды Vibrio очень подвижны и обладают жгутиками с полярными оболочками (12), которые сильно отличаются от жгутиков без оболочки, обнаруженных у E. coli и Salmonella . Мембранная оболочка выглядит как продолжение внешней мембраны, но ее функция остается плохо изученной. Более раннее исследование показало, что Vibrio с оболочкой жгутика потенциально может помешать иммунному ответу хозяина распознавать филамент (13).Более недавнее исследование показало, что вращение покрытых оболочкой жгутиков высвобождает липополисахарид, который может способствовать иммунному распознаванию во время инфекции Vibrio fischeri (14). Недавно для визуализации сборки покрытых оболочкой жгутиков in vivo было использовано быстрое исследование флуоресцентной визуализации с высоким разрешением (15). Исследования предоставляют доказательства в поддержку синхронного роста между оболочкой и филаментом. Однако механизм, лежащий в основе образования оболочки, остается неизвестным.
Vibrios используют ионы натрия в качестве источника энергии для вращения жгутиков, а белки PomA и PomB составляют статор, управляемый Na + (16).В отличие от статорного комплекса MotA / B, статорный комплекс PomA / B требует дополнительных компонентов Vibrio , MotX и MotY. Они образуют кольцеобразную структуру, называемую Т-образным кольцом, которое, по-видимому, характерно для управляемого натрием жгутикового двигателя (17⇓⇓ – 20). Другая кольцевая структура Vibrio (названная H-кольцом) расположена на вершине Т-образного кольца. FlgT является основным белковым компонентом H-кольца. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что оба кольца необходимы для сборки статора и функционирования статорного комплекса PomA / B (19, 21).
Чтобы лучше понять структуру и функцию жгутиков разных видов, криоэлектронная томография (крио-ЭТ) широко используется для визуализации интактных жгутиков в их клеточном контексте (22⇓ – 24). Несмотря на наличие общих тем, эти анализы продемонстрировали поразительное структурное разнообразие этих наномашин у разных бактерий (22). Например, двигатель Vibrio имеет 13 статоров, собранных вокруг ротора (25), тогда как двигатель Borrelia burgdorferi имеет 16 статоров и характерную периплазматическую деталь (26).Чтобы лучше понять покрытый оболочкой жгутик, а также структурные особенности, характерные для Vibrios , мы выбрали Vibrio alginolyticus в качестве модельной системы. Обширные генетические, функциональные и структурные исследования сделали полярный жгутик V. alginolyticus одним из наиболее охарактеризованных покрытых оболочкой жгутиков. Хотя V. alginolyticus обладает одним управляемым Na + полярным жгутиком, мутации привели к появлению множественных полярных фенотипов жгутиков (27⇓⇓ – 30), которые идеально подходят для структурной характеристики in situ с высоким разрешением.Здесь мы используем крио-ЭТ с высокой пропускной способностью и усреднение субтомограмм для всестороннего анализа моторов у нескольких мутантов V. alginolyticus , обеспечивая понимание аспектов жгутиков в оболочке и подвижности Vibrio .
Результаты
Визуализация
Vibrio в оболочке жгутиков в интактных клетках.V. alginolyticus VIO5 обычно имеет однополярный покрытый оболочкой жгутик (рис. 1 A ). К нашему удивлению, мы также наблюдали незащищенный жгутик после визуализации более 30 клеток дикого типа (рис.1 B ), что свидетельствует о редкости, но возможной сборке незащищенных жгутиков у V. alginolyticus . Как и ожидалось, диаметр нити без оболочки значительно меньше диаметра нити с оболочкой, и двигатели также заметно отличаются в оригинальных реконструкциях ячейки (Рис. 1 A и B ). Чтобы лучше выявить разницу между двумя разными типами жгутиков, мы хотели сравнить их бок о бок в одной ячейке. Для этого мы использовали мутант flhG , который, как известно, собирает множественные полярные жгутики (27, 28).Важно отметить, что множественные полярные жгутики обычно образуют большой кластер на одном полюсе клетки; малый диаметр ячейки около полюса оптимален для крио-ЭТ анализа с высоким разрешением (рис. 1 C ).
Рис. 1.In situ V. alginolyticus жгутиковые структуры: с оболочкой и без оболочки. ( A ) Репрезентативный срез трехмерной реконструкции V. alginolyticus VIO5 дикого типа показывает единственный покрытый оболочкой жгутик на полюсе клетки. ( B ) Другой срез показывает единственный незащищенный жгутик.( C ) На томографическом срезе штамма (KK148) видны множественные полярные жгутики. ( D ) Среднее значение по классу показывает структуру моторики жгутиков в оболочке. ( E ) Другой средний класс показывает структуру жгутиков без оболочки. ( F ) Усредненная структура двигателя E. coli используется в качестве эталона для сравнения. ( G — I ) Схематические модели накладываются на карты плотности крио-ET D — F соответственно.Ключевые различия между моторными структурами Vibrio и E. coli выделены: уплотнительное кольцо фиолетового цвета, кольцо H и кольцо T желтым, а дополнительная плотность (окрашена розовым цветом), расположенная за пределами кольца C. ЦМ — цитоплазматическая мембрана; ОМ, наружная мембрана. Плотность статора не видна в глобально усредненных структурах двигателей Vibrio и E. coli , вероятно, из-за высокодинамичной природы статоров.
Novel
Vibrio Жгутиковые двигательные структуры.Из ~ 600 томограмм различных бактериальных клеток мы создали ~ 4000 реконструкций двигателей, встроенных в клеточную оболочку. После тщательного сопоставления и усреднения субтомограмм мы получили две различные моторные структуры Vibrio с беспрецедентной детализацией (рис.1 D и E ) и сравнили эти структуры с моторной структурой из E. coli (рис.1 ). F ). Моторные структуры имеют несколько общих черт: они аналогичным образом встроены в цитоплазматическую и внешнюю мембраны и имеют кольцо C, кольцо MS, экспортный аппарат и стержень (включая проксимальный стержень и дистальный стержень) и окружающие его кольца L / P. (Рисунок.1 G — I ).
Несмотря на это сходство, двигатели Vibrio демонстрируют несколько заметных отличий от структур E. coli . Например, двигатели Vibrio обладают дополнительной плотностью (окрашены желтым цветом) вокруг колец L / P (Рис.1 G и H ), которые, вероятно, соответствуют специфическим для Vibrio структурам, таким как H и Т-образные кольца. Мы также наблюдали дополнительные структуры вокруг С-кольца (рис.1 D и G ) в Vibrio , которые отсутствуют в двигателе E. coli . Существует внешняя кольцеобразная структура, связанная только с покрытым оболочкой жгутиком (рис.1 D и G ), но не с незащищенным жгутиком (рис.1 E и F ), которую мы назвали O кольцо (внешнее мембранное кольцо). Интересно, что наличие этого кольца коррелирует с поразительным изгибом внешней мембраны на 90 ° и образованием мембранной оболочки, окружающей нить, что позволяет предположить, что уплотнительное кольцо может играть решающую роль в формировании и функционировании оболочки.Напротив, в отсутствие уплотнительного кольца внешняя мембрана четко пересекает L-кольцо в незащищенном жгутике Vibrio (рис.1 E и H ), а также жгутике E. coli (рис. Рис.1 F и I ).
Динамическая природа жгутикового двигателя в оболочке в
Vibrio .Сравнение жгутиковых двигателей в оболочке и без оболочки также предполагает внутреннюю гибкость, на что указывает относительная нечеткость кольца MS и кольца С в оболочке жгутикового двигателя (рис.1 D ). Для дальнейшего изучения этой потенциальной гибкости мы сгенерировали три различных средних класса, а затем выровняли их на основе кольца MS и кольца C (рис. 2 A — C ). Примечательно, что расстояние между цитоплазматической мембраной и внешней мембраной варьировалось от 35 до 29 нм (рис.2 A , C , D и F ), хотя наиболее распространенным классом было 32 нм (рис. 2 B и E ). Интересно, что внешняя мембрана и специфические для Vibrio особенности (T / H / O кольца) все координированно смещают свои позиции, указывая тем самым, что этот комплекс обладает гибкостью, чтобы скользить вдоль дистальной части жгутикового стержня.Напротив, жгутик без оболочки как у Vibrio , так и у E. coli оказывается жестким, вероятно, из-за тесного взаимодействия между внешней мембраной и L-кольцом.
Рис. 2.Конформационная гибкость жгутиковых двигателей в оболочке в Vibrio . Обшитые в оболочке моторные структуры жгутиков из трех различных средних классов показывают различия в расстоянии между CM и OM ( A — C ). Соответствующие схематические модели ( D — F ) показывают связанный с внешней мембраной комплекс, слегка смещающийся вдоль дистального стержня (голубой).
Определение характеристик компонентов Т-образного кольца на месте.
Основные особенности Vibrio схожи как для жгутиков с оболочкой, так и без нее (рис. 1). Хотя Т-образное кольцо является основной особенностью Vibrio , необходимой для сборки статора вокруг ротора (19), его структура и состав остаются неопределенными. Для характеристики Т-кольца мы использовали крио-ЭТ для анализа мутантов ∆ motX и ∆ motY на фоне flhG .У мутанта ∆ motY мы обнаружили, что большая часть плотности Т-кольца, расположенной под кольцом P, не видна по сравнению со штаммом дикого типа и мутантом ∆ pomAB , у которого отсутствуют статоры (рис. 1 G ). и H для дикого типа; рис.3 G и H для ∆ pomAB ; рис.3 B и C для ∆ motY ). В MotX-дефектных клетках не наблюдалось значительных различий в Т-кольце (фиг. 3 D — F ).Сравнение ∆ motX и ∆ pomAB жгутиков предполагает, что белок MotX, вероятно, расположен под MotY in situ (рис. 3 E , F , H и I ). Кроме того, плотности, соответствующие уплотнительному кольцу и H-кольцу, остаются видимыми в этих мутантах с Т-кольцом, предполагая, что их образование не зависит от сборки Т-кольца.
Рис. 3.Определение характеристик компонентов Т-образного кольца на месте. ( A ) Репрезентативный срез томограммы штамма ∆ motY .( B ) Усредненная структура двигателя ∆ motY . ( C ) Схематическая модель двигателя без MotY. ( D ) Репрезентативный срез томограммы мутанта ∆ motX . ( E ) Усредненная структура двигателя ∆ motX . ( F ) Схематическая модель двигателя без MotX. MotY окрашен в оранжевый цвет. ( G ) Типичный срез томограммы мутанта ∆ pomAB . ( H ) Усредненная структура двигателя ∆ pomAB .( I ) Схематическая модель двигателя без PomA и PomB. Вероятное расположение MotX, которое во многом основано на предыдущем анализе (19), отмечено желтым цветом.
Архитектура
Vibrio — Специального Т-образного кольца.Наши данные предполагают, что MotY является основным компонентом Т-образного кольца. Фактически, 13 копий мономера MotY хорошо вписываются в дистальную часть Т-кольца (рис. 4), основываясь на кристаллической структуре MotY и биохимических характеристиках, о которых сообщалось ранее (31).Каждый мономер MotY состоит из двух отдельных доменов. С-концевой домен MotY содержит предполагаемый пептидогликан-связывающий мотив, тогда как N-концевой домен MotY необходим для сборки статора (31). Один мономер может быть помещен в каждую субъединицу Т-кольца. Точно так же мы поместили 13 копий кристаллических структур FlgT в плотности на вершине кольца MotY на основе структурного и функционального анализа (21). Вместе с MotY они образуют уникальную структуру Vibrio вокруг P-кольца.
Рис. 4.Архитектура Т-образного кольца Vibrio . ( A ) Структура двигателя Vibrio с различными доменами выделена на 3D-рендеринге поверхности. ( B ) Кристаллические структуры MotY и FlgT были подогнаны к карте Т-кольца и небольшой части Н-кольца, соответственно. ( C ) Наружная мембрана и связанные с ней компоненты жгутиков были удалены, чтобы лучше видеть Т-образное кольцо. ( D ) На виде сверху двигателя Vibrio видно уплотнительное кольцо, крюк и ОМ.( E ) Другой вид сверху после удаления структур, связанных с OM, показывает CM, крючок и Т-образное кольцо. ( F ) Кристаллические структуры FlgT и MotY хорошо вписываются в Т-образное кольцо.
Статор собирается вокруг Т-образного и С-образного колец.
И MotY, и MotX участвуют в сборке и работе статора. Однако все усредненные структуры от моторов дикого типа и мутантов с Т-кольцом не показали каких-либо очевидных плотностей, которые могли быть внесены статорами. Фактически, структура мотора дикого типа аналогична структуре мотора ∆ pomAB , в котором статорные белки PomA и PomB отсутствуют.Следовательно, у V. alginolyticus или E. coli нет четко определенной структуры статора. Наше наблюдение согласуется с представлением о высокой динамичности статоров у этих видов.
Чтобы исследовать структуру и расположение статоров в V. alginolyticus , мы использовали трехмерную классификацию для анализа плотности вокруг Т-кольца и МС-кольца. В одном из 20 средних значений класса очевидны дополнительные плотности, окружающие Т-кольцо (рис. 5 A ), тогда как большинство средних значений по классам дикого типа и все средние по классам из ∆ pomAB не показывают этих структур, что свидетельствует о дополнительных плотности действительно формируются статорами (рис.5 А ). Чтобы визуализировать дополнительные плотности с большей ясностью, мы создали симметричную структуру комплекса статора (Рис. 5 A ), которая затем была отображена на общую структуру двигателя, как показано на Рис. 5 B и C .
Рис. 5.Общая архитектура жгутикового двигателя Vibrio . ( A ) Один средний класс двигателя дикого типа. Первая панель — это центральная секция. Вторая панель представляет собой разрез Т-образного кольца.Третья панель представляет собой поперечный разрез верхней части цитоплазматической мембраны (ЦМ). Четвертая панель представляет собой соответствующее поперечное сечение третьей панели после 13-кратной симметрии. Показаны вид сбоку ( B ) и вид сверху ( C ) всей конструкции жгутикового двигателя Vibrio .
Общая архитектура
Vibrio Flagellar Motor.Т-образное кольцо демонстрирует уникальную 13-кратную симметрию как в оболочке, так и без нее, и, вероятно, функционирует как платформа для набора 13 высокодинамичных статоров, собранных вокруг ротора (рис.5 Б ). MotY, потенциально прикрепленный к клеточной стенке, может функционировать как каркас для Т-кольца. Периплазматический домен статора, по-видимому, напрямую взаимодействует с MotY (рис. 5 B и C ). По сравнению с хорошо изученным мотором жгутика без оболочки у E. coli (рис.1 F и I ), эти специфические компоненты Vibrio не только отражают сложность жгутика с оболочкой Vibrio (рис. 5 C ), но также обеспечивают прочную основу для установления характерной высокой скорости и устойчивости подвижности Vibrio .
Обсуждение
A
Vibrio flhG Штамм как модельная система для структурного анализа жгутиков в оболочке in situ.Полярный жгутик V. alginolyticus был тщательно изучен с помощью генетических, биохимических, функциональных и структурных подходов и является признанной моделью покрытого оболочкой жгутика (32). Однако, несмотря на успех крио-ЭТ в характеристике многих других бактериальных жгутиковых структур (23⇓ – 25, 33⇓⇓⇓⇓ – 38), этот метод ранее не использовался для визуализации интактных V.alginolyticus жгутиковый мотор, отчасти потому, что однополярный жгутик в больших клетках V. alginolyticus неоптимален для высокопроизводительного крио-ET-анализа. К счастью, дефектный локус flhG приводит к множественным полярным жгутикам у V. cholerae и V. alginolyticus (27⇓ – 29), а также у Pseudomonas и Shewanella (39, 40). Недавно дефект в hubP также дал фенотип множественных жгутиков в V.alginolyticus (30). Хотя клеток V. alginolyticus все еще крупнее оптимального, область полюса клетки с множественными жгутиками часто бывает достаточно тонкой для крио-ЭТ визуализации. Вместе с генетическими подходами, доступными для создания дополнительных мутаций в дефектном фоне flhG , штамм с множественными полярными жгутиками V. alginolyticus является идеальной модельной системой для структурного анализа с высоким разрешением жгутиков в оболочке in situ.
Сравнение жгутиков в оболочке и без оболочки показывает значительную реконструкцию внешней мембраны.
Как и ожидалось, большинство полярных жгутиков, наблюдаемых у клеток V. alginolyticus , покрыты оболочкой. Однако, к нашему удивлению, жгутики без оболочки были обнаружены в клетках дикого типа V. alginolyticus . Комбинация крио-ЭТ с высокой производительностью и клеток с множественными полярными жгутиками позволила нам получить достаточно данных для определения двух различных структур жгутиков в оболочке и без оболочки в одной и той же клетке. Основные компоненты двух отдельных жгутиков Vibrio сопоставимы с таковыми у E.coli , включая кольцо C, устройство экспорта, кольцо MS, стержень, кольца P / L и крючок. Кроме того, внешняя мембрана, по-видимому, напрямую взаимодействует с L-кольцом необолочечного жгутика у V. alginolyticus и E. coli , хотя незащищенный жгутик Vibrio имеет Т-кольцо и Н-кольцо, оба специфичные для . Вибрионы .
Важно отметить, что жгутик в оболочке V. alginolyticus разительно отличается от жгутика без оболочки в точке, где жгутик пересекает внешнюю мембрану.Примечательно, что в оболочке жгутика есть новое уплотнительное кольцо, которое связано с изгибом на 90 ° внешней мембраны, которая образует оболочку вокруг крючка и нити. Мы предполагаем, что уплотнительное кольцо может образовывать каркас для драматического ремоделирования внешней мембраны, чтобы сформировать оболочку. Примечательно, что уплотнительное кольцо еще не было обнаружено в недавно описанных структурах покрытых оболочкой жгутиков V. fischeri (25) и H. pylori (36). Тем не менее, жгутики разных видов в оболочке имеют общую тему: внешняя мембрана не пересекается напрямую с L-кольцом, которое функционирует как втулка, встроенная во внешнюю мембрану в модельных системах, таких как E.coli и Salmonella . FlgO представляет собой белок внешней мембраны, необходимый для подвижности жгутиков у Vibrio cholerae (41). FlgO хорошо сохраняется у видов Vibrio . Поэтому мы предположили, что уплотнительное кольцо может состоять из FlgO. Мутагенез и маркировка GFP-тегов вместе с Cryo-ET потребуются для идентификации генов, ответственных за образование уплотнительного кольца.
Структура и функции уникальной особенности
Vibrio-.Модель V.alginolyticus flagellum обладает двумя специфическими для Vibrio особенностями в периплазме: Т-кольцом и Н-кольцом. Структура Т-образного кольца является важным компонентом управляемого ионами натрия жгутикового двигателя в дополнение к PomA / B (19). Наш сравнительный анализ моторных структур клеток дикого типа и нескольких мутантов Т-кольца (∆ motX ∆ motY , ∆ motX , ∆ motY ) показал, что T-кольцо имеет 13-кратную симметрию. MotY является основным белком, ответственным за его сборку, поскольку 13 копий MotY хорошо вписываются в Т-кольцо.Напротив, расположение MotX четко не определено, поскольку делеция гена motX не изменила существенно общую форму Т-кольца. Поскольку MotX взаимодействует с MotY, и оба белка важны для сборки статора (19, 42), мы постулируем, что MotX собирается на внешнем крае Т кольца.
H-образное кольцо, похоже, связано с L-образным кольцом и важно для сборки и работы двигателя. FlgT играет критическую роль в образовании H-кольца, которое, вероятно, состоит из других жгутиковых белков, таких как FlgO и FlgP.Однако общая структура кольца H намного сложнее. Мы предполагаем, что FlgT образует кольцо поверх кольца MotY. Наша модель подтверждается предыдущими биохимическими данными и наблюдением, что мутантные клетки ∆ flgT теряют как Т-, так и Н-кольца (43).
И H, и T-кольца тесно связаны с L / P-кольцами. Они образуют большой комплекс, специфичный для Vibrio , под внешней мембраной. Важно отметить, что мы продемонстрировали, что 13-кратная симметрия Т-колец сохраняется как у штаммов дикого типа, так и у штаммов ∆ pomAB , указывая на то, что симметричные особенности Т-кольца не зависят от статоров.Напротив, 13-кратная симметрия Т-кольца не видна в структуре мотора V. fischeri (25), хотя есть 13 статоров, связанных с мотором V. fischeri (Рис. S1). Одна из возможностей состоит в том, что статоры в V. fischeri более статически локализованы вокруг двигателей, как и в спирохетах (24, 37). Разумно предположить, что в V. alginolyticus 13-кратное симметричное Т-кольцо обеспечивает платформу для набора до 13 статоров динамическим образом, возможно, в ответ на факторы окружающей среды (44).
Рис. S1.Сравнение жгутиковых двигателей между V. fischeri и V. alginolyticus . ( A ) Центральный участок усредненной структуры (EMD-3156) из 251 моторной частицы в мутанте ∆ pomB из V. fischeri . ( B ) Центральная часть усредненной структуры усредненная моторная структура из 999 моторных частиц в V. alginolyticus ∆ flhG ∆ pomAB . Красные стрелки подчеркивают разницу в уплотнительном кольце.( C ) Поперечное сечение Т-образного кольца, как показано желтой пунктирной линией в A . ( D ) Поперечное сечение Т-образного кольца показывает 13-кратную симметрию Т-образного кольца. Никакой очевидной симметрии не видно в Т-образном кольце конструкции двигателя из V. fischeri ∆ pomB . (Масштабная шкала, 20 нм.)
Действительно, хотя плотности статора в V. alginolyticus могут быть локализованы за пределами Т-образного кольца в некоторых средних классах, они не наблюдаются в среднем глобальном масштабе, что согласуется с представлением о том, что статоры очень динамичны в цитоплазматической мембране, как было продемонстрировано ранее (9–11).Динамическая природа статоров Vibrio зависит от ионов натрия (7), FliL и других белков (45). Действительно, статоры у разных видов значительно различаются. Максимальное количество статоров в E. coli составляет не менее 11, как измерено с помощью флуоресцентной микроскопии полного внутреннего отражения (5). Новаторское крио-ET исследование жгутикового двигателя Treponema primitia выявило предполагаемое кольцо статора с 16-кратной симметрией (24). Крио-ЭТ исследование B.burgdorferi показал, что 16 статоров встроены в сильно изогнутую цитоплазматическую мембрану спирохет (26, 37). Недавнее исследование жгутикового мотора V. fischeri выявило 13 статоров (25), тогда как H. pylori может иметь 18 статоров вокруг ротора (36).
Внутренняя пластичность жгутиков с оболочкой.
Мы обнаружили удивительные и значительные различия в расстоянии между кольцом MS и внешним мембранно-связанным комплексом в изображенных нами жгутиковых двигателях V. alginolyticus .Поскольку жгутиковые стержни в клетках дикого типа имеют постоянную длину, мы предполагаем, что наблюдаемое нами изменение длины является результатом способности колец L / P / H / T / O скользить вдоль дистального стержня вместе с соответствующим внешним стержнем. мембрана. Хотя обычно считается, что стержень вращается внутри P и L колец, которые функционируют как втулки в слое PG и внешней мембране, соответственно, ранее не сообщалось, что кольца P / L могут скользить по стержню. Было показано, что несколько P-колец собираются вокруг более длинного стержня; однако P-кольца не были расположены равномерно (46), предполагая, что P-кольцо может по-разному взаимодействовать с нижележащим белковым компонентом FlgG дистального стержня.Фактически, недавнее структурное исследование показало, что дистальный стержень имеет жесткую и гладкую поверхность диаметром ~ 13 нм и длиной 18 нм (47). Эти общие свойства дистального стержня согласуются с его основной функцией как приводной вал и могут позволить внешнему мембранно-связанному комплексу гибко перемещаться вместе с мембранной оболочкой во время вращения жгутиков. В качестве альтернативы, изменения расстояния могут отражать конструкции, которые фиксируются для каждого двигателя, но отличаются по длине для разных двигателей.
В заключение, наши результаты показывают, что В.Система alginolyticus идеально подходит для изучения архитектуры жгутиков в оболочке in situ. Мы выявляем кольцо внешней мембраны и большое конформационное изменение внешней мембраны, связанное с образованием оболочки и сборкой жгутиков. Мы также обнаружили значительные вариации в расположении мотора относительно жгутикового стержня, что указывает на удивительный уровень конформационной гибкости покрытых оболочкой жгутиков. Кроме того, мы демонстрируем 13-кратную симметрию двигателя, что дает основу для лучшего понимания конкретных взаимодействий ротора и статора в Vibrio .Наконец, наши исследования дают представление об уникальных аспектах покрытых оболочкой жгутиков, которые широко используются многими бактериальными патогенами для установления инфекции и распространения среди людей и других млекопитающих-хозяев.
Материалы и методы
Рост бактерий и подготовка образцов.
Бактериальные штаммы, использованные в этом исследовании, перечислены в таблице 1. штаммов V. alginolyticus культивировали в течение ночи при 30 ° C на среде VC [0,5% (вес / объем) полипептон, 0,5% (вес / объем) дрожжевой экстракт, 3% (вес / объем) NaCl, 0.4% (вес / объем) K 2 HPO 4 , 0,2% (вес / объем) глюкозы]. Ночную культуру разводили в 100 раз свежей средой VC и культивировали при 30 ° C при 250 об / мин (Taitec, BioShaker BR-23FH). Через 5 ч клетки собирали, промывали 2 раза и, наконец, разбавляли средой TMN500 (50 мМ Трис · HCl при pH 7,5, 5 мМ глюкоза, 5 мМ MgCl и 500 мМ NaCl) (48). Раствор коллоидного золота (диаметром 10 нм) добавляли к разбавленным образцам Vibrio , чтобы получить 10-кратное разбавление, а затем наносили на только что нагретую решетку из дырявого углерода с дырочками и осаждали на 1 мин.Сетку промокали фильтровальной бумагой и быстро погружали в жидкий этан в самодельном плунжерном устройстве, как описано (49).
Таблица 1.Штаммы бактерий
Cryo-ET Сбор данных и обработка изображений.
Замороженные гидратированные образцы переносили в электронный микроскоп Polara G2 (FEI), оборудованный автоэмиссионной пушкой на 300 кВ и детектором прямых электронов (Gatan K2 Summit). Изображения наблюдались при увеличении 15 400 раз, что дало 0,25 нм / пиксель.SerialEM (50) использовался для сбора серий наклона при дефокусировке ~ 8 мкм. Общая доза 50 e — / Å 2 распределяется между 35 изображениями с наклоном, охватывающими углы от -51 ° до + 51 ° с шагом наклона 3 °. Для каждого сбора серии наклона использовался режим фракционирования дозы для создания 8–10 кадров на одно проекционное изображение. Собранные фракционированные по дозе данные сначала обрабатывались программой motioncorr для создания файлов стека с коррекцией дрейфа (51). Файлы стека были выровнены с использованием золотых реперных маркеров и объемов, реконструированных методом взвешенной обратной проекции, с использованием программного обеспечения IMOD (52) для создания томограмм.Всего было получено 1293 томограммы клеток дикого типа и мутантных клеток (таблица 2).
Анализ субтомограмм.
Жгутиковые моторы бактерий определяли вручную с помощью программы i3 (53, 54). Мы выбрали две точки на каждом двигателе: одну точку в области С-образного кольца, а другую — возле крючка жгутика. Затем оценивались ориентация и географические координаты выбранных частиц. Всего 8761 субтомограмма двигателей Vibrio и 1200 субтомограмм E.coli использовали для анализа субтомограмм. Томографический пакет i3 использовался на основе метода «выравнивания по классификации» с отсутствующей компенсацией клина (53, 54) для создания усредненной структуры двигателя, как описано ранее (33, 49).
3D визуализация и моделирование.
Томографические реконструкции были визуализированы с использованием IMOD (52). Программное обеспечение UCSF Chimera использовалось для трехмерной визуализации средних значений субтомограмм и молекулярного моделирования (55).Кристаллические структуры MotY (PDB ID: 2ZF8) и FlgT (PDB ID: 3W1E) из V. alginolyticus были прикреплены к нашим картам плотности с использованием функции «вписаться в карту» в UCSF Chimera.
Благодарности
Мы благодарим Уильяма Марголина за критическое прочтение рукописи перед отправкой. Эта работа была поддержана GM107629 от Национального института общей медицины и AU-1714 от Welch Foundation (J.L.).
Сноски
Автор: С.Z., S.K., M.H. и J.L. спланировали исследование; S.Z., T.N., B.H., S.K. и J.L. проводили исследования; Т. внесены новые реагенты / аналитические инструменты; S.Z., S.K., M.H. и J.L. проанализировали данные; и С.З., С.К., М.Х. и Дж.Л. написали статью.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.
Эта статья содержит вспомогательную информацию на сайте www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.1073/pnas.1712489114/-/DCSupplemental.
Что такое кабель с неметаллической оболочкой?
Если ваш дом был построен (или перемонтирован) примерно после 1965 года, вероятно, что большая часть его системы электропроводки состоит из кабеля с неметаллической оболочкой NM (неметаллический). Кабель NM, иногда известный как Romex, названный в честь одной из распространенных торговых марок, представляет собой гибкий электрический кабель с внешней пластиковой оболочкой, которая защищает два или более изолированных проводника, а также неизолированный медный провод заземления.
Клэр Коэн Клэр КоэнИстория использования неметаллических кабелей
Кабель NM был изобретен компанией Romex в 1922 году и впервые был описан и внесен в список NEC (Национальный электротехнический кодекс) в 1926 году, но он не получил широкого распространения до начала 1960-х годов, когда пластмассы заменили тканый вискозу в качестве материала, используемого для внешняя обшивка.С этого момента кабель NM стал стандартом для прокладки бытовой электропроводки в скрытых местах, внутри стен, а также в полостях пола и потолка. Сегодня кабель NM является стандартом почти для всех применений, за исключением открытых мест, например, у стен подвала или вдоль открытых внешних стен, где кабелепровод все еще является стандартом.
Интересный факт
Его популярность объясняется тем фактом, что кабель NM очень прост в использовании и довольно дешев по сравнению с другими методами прокладки проводов, такими как металлический кабелепровод или армированный кабель.
Сравнение двухжильного и трехжильного неметаллических кабелей
Для большинства схемных приложений обычно используемый кабель NM описывается как «двухпроводный» или «трехжильный» кабель. Это обозначение относится к количеству изолированных проводов, содержащихся в кабеле. Однако это обозначение немного вводит в заблуждение, поскольку как двухпроводные, так и трехпроводные кабели также содержат дополнительный провод заземления из чистой меди. Таким образом, двухжильный кабель часто называют «двухпроводным с заземлением», а трехжильный кабель продается как «трехжильный с заземлением».«В двухпроводном кабеле один изолированный провод имеет черную изоляцию (обычно это горячий провод), а другой провод имеет белую изоляцию (обычно служит нейтральным проводом). В трехпроводном кабеле есть один белый нейтральный провод, плюс черный и красный горячий провод.
На упаковке кабеля NM используется удобный ярлык, который позволяет сразу определить характеристики кабеля:
- Кабель с маркировкой «14/2 Вт / G» имеет два провода калибра 14 плюс заземление.
- Кабель с маркировкой «14/3 Вт / G» имеет три проводника калибра 14 плюс заземление.
- Кабель с маркировкой «12/2 Вт / G» имеет два провода калибра 12 плюс заземление.
- Кабель с маркировкой «12/3 Вт / G» имеет три проводника калибра 12 плюс заземление.
Наряду с неизолированным медным заземляющим проводом внутри кабеля проплетена бумажная обертка, которая предотвращает слипание проводов и облегчает изгибание кабеля во время установки.
Изолированные проводники, неизолированный медный провод заземления и бумажная обертка заключены в прочную пластиковую оболочку из ПВХ, непроводящую и термостойкую.
Использование трех типов неметаллических кабелей
Строительный кабель (NM-B)
Кабель NM доступен в различных формах, в зависимости от его предполагаемого использования. Стандартный кабель NM, используемый для внутренней проводки в жилых помещениях внутри стен, полов и потолков, известен как NM-B. Этот кабель одобрен для использования только в сухих местах; вы никогда не увидите, чтобы его использовали на открытом воздухе или закопали под землю.
В какой-то момент все кабели NM имели белую оболочку, но кабель NM-B, продаваемый сегодня, имеет внешнюю оболочку с цветовой кодировкой, которая служит для быстрой идентификации калибра провода кабеля.
- Кабель с жилами калибра 14 в белой оболочке (используется для цепей на 15 ампер).
- Кабель с жилами 12-го калибра в желтой оболочке (применяется в цепях на 20 А).
- Кабель с жилами 10-го калибра в оранжевой оболочке (применяется для цепей на 30 А).
Подземный питающий кабель (UF-B)
Если кабель необходимо проложить под землей, потребуется кабель другого типа. Этот подземный питающий кабель, известный как кабель UF-B, имеет проволочные жилы, заключенные в твердый пластик, а не в полую оболочку; цвет кабеля обычно серый.Кабель UF-B — это то, что используется, когда вы прокладываете подземные цепи до гаража или сарая, или когда вы подключаете питание к уличному фонарю или другому ландшафтному объекту.
Сервисный входной кабель (SE)
Еще один тип кабеля NM используется коммунальной компанией для подачи электропитания в ваш дом над головой или через землю. Кабель типа SE используется для наземных коммуникаций, а тип USE — для подземных коммуникаций. Домовладельцам почти никогда не приходится иметь дело с этим типом кабеля, так как с ними обращаются только специалисты по коммунальному обслуживанию.
бактерий в оболочке | Encyclopedia.com
Бактерии в оболочке — это бактерии, которые растут в виде длинных волокон, внешняя сторона которых покрыта слоем, известным как оболочка. Внутри оболочки бактерии могут расти и делиться. Примеры бактерий в оболочке включают Leptothrix discophora (также известные как «железные бактерии») и Sphaerotilus natans .
Бактерии в оболочке — обычное явление в бактериальных сообществах воды и почвы.В этих средах оболочка часто покрыта осадками элементов из воды или почвы, таких как оксиды железа и марганца. Элементы нестабильны в растворе и, следовательно, легко выйдут из решения при представлении соответствующего сайта.
Оболочка, покрывающая бактерии, может иметь различную конструкцию. Большая часть структурной информации была получена при наблюдении тонких срезов образца с использованием просвечивающего электронного микроскопа .Оболочка, окружающая виды Leptothrix , внешне похожа на гликокаликс. Часто осаждение металлов в сетке оболочки приводит к образованию участков, в которых материал кристаллизовался. Напротив, оболочка Sphaerotilus natans имеет вид «железнодорожных путей», который типичен для биологической мембраны, состоящей из двух слоев липидных молекул.
Электронно-микроскопические исследования видов Leptothrix показали, что бактерия тесно связана с вышележащей оболочкой.Соединения состоят из выпуклостей, которые находятся по всей поверхности бактерии. Напротив, Sphaerotilus natans не связан с вышележащим влагалищем.
И Leptothrix , и Sphaerotilus natans могут существовать независимо от оболочки. Бактерии обоих родов имеют жизненный цикл, который включает в себя свободно плавающую форму (называемую роевой клеткой), которая не покрыта оболочкой. У свободно плавающих форм есть жгутики на одном конце бактерий, которые продвигают клетки.Если бактерии заключены в оболочку, они называются бактериями в оболочке или покоящимися бактериями.
Оболочки бактерий, как правило, производятся, когда бактерии находятся в водной или почвенной среде, содержащей большое количество органических веществ. Оболочка может служить для защиты бактерий в этих средах. Кроме того, способность металлических соединений осаждаться на оболочке может обеспечить бактерии легким запасом таких неорганических питательных веществ. Например, Leptothrix может использовать марганец, содержащийся в осадке оксида марганца на оболочке.
Оболочки также могут помочь бактериям выжить в широком диапазоне температур и pH , обеспечивая относительно инертный барьер для внешней среды.
См. Также Бактериальные придатки; Почвообразование, участие микроорганизмов
Заключено в предложение (особенно хорошее предложение, например, цитата, пословица …)
1. Телевизор был обшит уютным покрывалом.
2. Травянистые холмы окутаны туманом.
3. Ландшафт был покрыт льдом.
4. Пуленепробиваемые машины обшиты броней.
5. Он вложил меч в ножны.
6. Он вложил нож в ножны и привязал его к голени.
7. Мари Хелвин обнаженная, на шпильках и , закутанная в бинты .
8. Это было похоже на то, как будто обернули в шелковые ножны.
9. Его взгляд скользнул по ее ногам , в ножнах в прекрасных черных чулках.
10. Но кинжалы остались в ножнах во время еды, и она позволила своим мыслям погрузиться в эти сверкающие воды.
11. Ему было , он был в синем чулке с желтыми полосами, идущими от подмышек до щиколоток.
12. Дно было , обшитое латунным сплавом, называемым металлом Muntz.
13. Его стены и пол были обшиты гипсовыми плитами, а потолок был выкрашен в синий цвет и поддерживался гипсовым столбом.
14. У вас , в черной ткани, и у вас много бледных веснушек.
15. Гибкая резина — в оболочке Кабели для горных работ.
16. Алюминиевый провод с ПВХ изоляцией, силовой кабель в оболочке из ПЭ .
17. Алюминиевый проводник с изоляцией из сшитого полиэтилена, тонкой стали, армированной ПВХ , в оболочке Кабель силовой из негорючего материала.
18. Когда тендинит возникает в сухожилие с оболочкой , это называется тендосиновитом.
19. Кирпан, в ножнах, , трехдюймовый нож с затупившимся лезвием, является одним из священных символов религии сикхов.
20. Качество сварки термопар в оболочке исследовали методом рентгеновского контроля. Представлены конструкция пенетрометра, методика испытаний и результаты испытаний.
21. Затем, когда они бьют друг друга, они держат свои когти в ножнах .
22. Сменяющиеся ветры обдували камни, деревья и кусты облаками брызг, пока они не стали казаться , покрытыми алебастром.
23. Они выбрались из полицейской машины и направились по узкому переулку, легко опираясь руками на свои , вложенные в ножны дубинки .
24. Он поднял свой меч двумя руками так, чтобы рукоять оказалась на уровне его лица, затем вложил в ножны и поклонился.
25. Мемориальная доска неправильной формы из Тронного святилища в Кноссе показывает кинжал в ножнах, висящий на декоративном поясе.
26. Оружия не было видно, хотя Алексей догадывался, что кинжал был вложен в ножны в рукаве Джотана.
27. Термочувствительный элемент управления (2) предусмотрен в емкости для нагрева жидкости или для использования в ней, имеющей электрический нагреватель (92) с кожухом , установленный на пластине (80) диффузора, предусмотренной на его основании (8).